江西省科学院生物资源研究所,江西省观赏植物遗传改良重点实验室,南昌, 330096
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 1 篇
收稿日期: 2019年04月12日 接受日期: 2019年05月13日 发表日期: 2020年06月22日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 1 篇
收稿日期: 2019年04月12日 接受日期: 2019年05月13日 发表日期: 2020年06月22日
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摘 要
生长素响应因子 ARF在植物生长发育过程中发挥着重要的作用。本研究采用同源克隆和 RACE
相结合的方法,从杂交鹅掌楸叶片中克隆 ARF2 的同源基因,命名为 LhARF2,对基因蛋白序列进行生物信
息学分析,基因全长 3 193 bp,包含 2 589 bp的开放阅读框, 编码 862 个氨基酸的蛋白质。蛋白质分子量为
96.19 kD,理论等电点为 6.21,为不稳定蛋白质;蛋白质二级结构包括 琢- 螺旋、 茁- 折叠、不规则卷曲和延伸
链,以不规则卷曲为主;蛋白质三级结构分析显示该蛋白与拟南芥生长素响应因子(SMTL编号: 4ldy.1)的序
列相似性最高(67.89%)。功能结构域分析显示该蛋白质包括B3、 Auxin_resp和 AUX_IAA结构域。系统进化
树分析表明LhARF2 所编码的蛋白质与莲(Nelumbo nucifera) XP_010250544.1亲缘关系最近。激素诱导生根
试验表明,拟南芥 T2 代幼苗相比较野生型,在没有激素处理下,根系长度差异不大;在外源激素 IBA处理
下,根系长度明显伸长。实时定量分析显示在 IBA激素诱导下,根系和叶片表达量均上调,根系中 LhARF2
上调幅度分别高于 WT和叶片。结果表明 LhARF2 基因在拟南芥中对根的生长具有促进作用, LhARF2 基因
受 IBA激素正向调控。该研究结果为进一步分析杂交鹅掌楸 LhARF2基因的功能及利用奠定基础。
关键词
杂交鹅掌楸(Liriodendron hybrids);克隆;LhARF2 基因;根系长度;表达分析