杨柳 , 李晓峰 , 祝万万 , 张大兵^*

上海交通大学生命科学技术学院, 上海, 200240
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2019年04月09日    接受日期: 2019年05月14日    发表日期: 2020年06月24日

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OsMA DS56 是水稻中长日照下的开花抑制基因，与拟南芥中同时影响开花时间和花发育的 SOC1同源。为了深入探究 OsMADS56 基因对水稻开花时间的调控功能，本研究利用反向遗传学的方法通过CRISPR/Cas9 基因编辑技术对 OsMADS56 基因设计了 2 个特异性敲除靶位点，构建了 OsMADS56 基因敲除载体，并通过农杆菌介导的转化方法成功获得了野生型粳稻 9522 背景的转基因苗。鉴定结果显示 9 棵OsMADS56 转基因苗中包含了 3 种纯合突变类型，包括第一个外显子第 45 号碱基处缺失了一个 G 碱基、缺失了包含了第一个起始密码子的 100 个碱基对以及在第 5 个外显子第 322 号碱基处插入一个 A 碱基。通过蛋白序列比对分析，发现这三种类型的突变均造成移码突变和蛋白翻译提前终止引起保守结构域的缺失。本研究获得的水稻 OsMADS56 基因的三个突变体株系对今后进一步深入研究该基因的功能具有重要意义。

水稻(Oryza sativa L.)；OsMADS56；MADS-box；CRISPR/Cas9