海南大学热带农林学院, 海口, 570228
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 9 篇
收稿日期: 2018年12月07日 接受日期: 2019年04月11日 发表日期: 2019年05月22日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 9 篇
收稿日期: 2018年12月07日 接受日期: 2019年04月11日 发表日期: 2019年05月22日
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摘 要
低温是重要的环境胁迫因子,严重影响中国橡胶树的分布及胶乳的产量。在拟南芥中,低温能够激活蛋白激酶 SnRK2.6,并提高植物耐寒性能,但橡胶树中的 SnRK2.6 至今未被克隆。本研究以橡胶树 7-33-97为材料,从 cDNA 中扩增出两个 SnRK2.6 基因(HbSnRK2.6A 和 HbSnRK2.6B)。氨基酸序列比对分析表明,HbSnRK2.6A 和 HbSnRK2.6B 与其他物种中的SnRK2.6 存在较高的同源性。将 HbSnRK2.6A 及 HbSnRK2.6B构建到原核表达载体上,在 E. coli (DE3)中诱导并纯化 HbSnRK2.6 重组蛋白,结果表明 HbSnRK2.6A 和 HbSnRK2.6B的最佳诱导条件是:16 ℃诱导 16 h,IPTG 浓度为 0.6 mmol/L。最终我们成功在大肠杆菌中表达并得到了大量橡胶树中的蛋白激酶 SnRK2.6。
关键词
巴西橡胶树;冷胁迫; SnRK2.6;原核表达