罗冬梅^1,2* , 赵亚文^1,2* , 荆永琳^2,3 , 徐立^2** , 李志英²

1 南京农业大学园艺学院, 南京, 210095; 2 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所, 农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室, 儋州, 571700; 3 海南大学热带农林学院, 海口, 570228
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 21 篇   
收稿日期: 2018年09月17日    接受日期: 2018年10月04日    发表日期: 2019年05月17日

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为研究漆酶在牛大力生长发育过程中的生物学功能，本实验以牛大力叶片为材料，从反转录 PCR获得的 cDNA 中扩增出漆酶基因 CsLAC17 全长。序列分析表明，CsLAC17 cDNA 全长为 2 010 bp，开放阅读框大小为 1 755 bp，编码一个由 584 个氨基酸组成的蛋白质。结构域分析表明，CsLAC17 蛋白的保守结构域具有漆酶典型结构域的特征——铜离子结合域(Cu-oxidase 和 Cu-oxidase-2)。同源序列分析表明，CsLAC17蛋白序列与绿豆(Vigna radiata var. radiata)和野生大豆(Glycine soja)同源性为 88%、藜豆(Mucuna pruriens)87%、蒺藜苜蓿(Medicago truncatula) 85%。组织特异性表达分析显示，CsLAC17 在茎中表达量最高，叶中表达量次之，根中较少。此外，进一步构建了 pBI121-CsLAC17 过表达载体并转入农杆菌。本研究为日后 CsLAC17基因的功能验证以及为牛大力开展分子生物学研究提供帮助。
 

牛大力；CsLAC17；基因克隆；组织表达特异性；表达载体