冯力平^1,2 , 张贝^1,2 , 何朝族^1,2 , 罗红丽^1,2*

1 海南大学热带农林学院, 海口, 570228; 2 海南大学, 海南省热带生物资源可持续利用重点实验室, 海口, 570228
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 14 篇   
收稿日期: 2018年01月14日    接受日期: 2018年04月17日    发表日期: 2019年08月08日

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橡胶树炭疽病是橡胶树的重要真菌病害之一，主要由胶孢炭疽菌引起。效应蛋白是病原菌侵染植物的重要致病因子，在寄主与病原菌的相互识别中发挥重要作用。为了进一步阐明橡胶树炭疽菌的致病机理，课题组前期对橡胶树胶孢炭疽菌的效应蛋白在基因组水平上进行了预测，其中一个编码候选效应蛋白的基因被命名为 CgE35。本研究对 CgE35 基因进行了扩增，并对其所编码的效应蛋白 CgE35 进行了生物信息学的分析，分析结果表明，该基因编码一条由 200 个氨基酸组成的多肽，分子质量约为 21.7 kD，其氨基段含有一段由 24 个氨基酸组成的典型信号肽序列，且该蛋白不含任何跨膜结构域和已知的保守结构域。为了进一步研究该基因的功能，我们根据同源重组原理，构建了 CgE35 基因的敲除载体 pCB1532-CgE35，通过 PEG介导的原生质体转化法将其转入胶孢炭疽菌原生质体细胞中进行同源交换，经过对转化子进行抗性筛选和分子鉴定，获得 CgE35 基因的敲除突变体 驻CgE35，并对其孢子产量和菌落生长情况进行分析，发现胶孢炭疽菌 CgE35 基因的敲除突变体 驻CgE35 的孢子产量明显低于野生型菌株，而二者的菌落生长情况没有差异。以上结果表明，橡胶树胶孢炭疽菌 CgE35 基因编码一个未知功能的分泌蛋白，该基因与胶孢炭疽菌的产孢能力有关，但与其菌丝的生长关系不大。本研究结果为阐明胶孢炭疽菌的致病机理，建立新型橡胶树炭疽病防控策略提供理论依据。

胶孢炭疽菌；效应蛋白；CgE35 基因；基因敲除；孢子产量