杨迷 , 胡燕 , 李继洋 , 李月 , 刘超 , 代培红 , 刘晓东 ^*

新疆农业大学农学院, 新疆农业大学农业生物技术重点实验室, 乌鲁木齐, 830052
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2019年03月21日    接受日期: 2019年03月28日    发表日期: 2020年05月26日

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为了阐明拟南芥 ROP 蛋白家族成员 ROP2 与蛋白异戊二烯化中 I 型香叶酰基的 β 亚基 GGB 的互作关系，本研究先后采用酵母双杂交和三杂交技术分析了两者之间的相互作用。结果表明，ROP2 与 GGB 之间在酵母细胞中并没有发生相互作用。我们又采用双分子荧光互补(BiFC)技术在植物体内再次验证两者之间的相互作用。重新构建了一套带多克隆位点的常规 BiFC 重组表达载体，基于这套 BiFC 载体，进行了验证分析。结果表明，实验组在本氏烟草的表皮细胞中发现了黄色荧光信号，并且信号定位在细胞膜上，而阴性对照组未发现荧光信号，说明 GGB 蛋白与 ROP2 蛋白在植物体内存在相互作用，并且这种相互作用发生在细胞膜上。本研究结果为进一步揭示 ROP2 的生化调控机制奠定了前期基础。
 

酵母杂交；双分子荧光互补(BiFC)；GGB；ROP2；蛋白质互作；酶切连接