广西大学农学院, 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室, 南宁, 530004
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 15 篇
收稿日期: 2019年03月18日 接受日期: 2019年03月25日 发表日期: 2020年05月28日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 15 篇
收稿日期: 2019年03月18日 接受日期: 2019年03月25日 发表日期: 2020年05月28日
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摘 要
成花诱导是开花植物生长发育过程中最为重要的一环,而开花整合因子 Flowering Locus T (FT)在这一过程中起非常重要的调控作用。目前,FT 基因调控芒果成花的作用机制尚不清楚。本研究以‘四季蜜芒’为材料,克隆验证了从转录组测序数据中挖掘获得的 3 个 FT 同源基因,命名为 MiFT1、MiFT2 和 MiFT3。生物信息学分析显示,3 个 MiFTs 基因编码区长度分别为 588 bp、540 bp 和 516 bp,分别编码氨基酸 196 个、180 个和 172 个,分子量分别为 48.97 kD、44.71 kD 和 42.27 kD,等电点分别为 4.99、5.06 和 5.06,3 个基因均含有一个保守的 PEBP 结构域。将 MiFT1、MiFT2 和 MiFT3 基因定向克隆到酵母表达载体 pGBKT7 上,通过菌落 PCR 和测序进行验证,并成功转化酵母菌株 Y2H Gold 感受态细胞。对诱饵质粒酵母菌进行自激活和毒性检测,发现 pGBKT7-MiFT1、pGBKT7-MiFT2 和 pGBKT7-MiFT3 在酵母菌种均不具备自激活性和毒性。此酵母诱饵蛋白表达载体被成功构建,为后续蛋白互作筛选提供参考。
关键词
芒果(Mangifera indica L.);基因克隆;Flowering Locus T;载体构建