曾琪琦 , 蒋湘宁 , 盖颖

北京林业大学生物科学与技术学院, 国家林业与草原局树木花卉育种生物工程重点实验室, 北京, 100083
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 1 篇   
收稿日期: 2019年03月11日    接受日期: 2019年04月18日    发表日期: 2020年04月30日

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为克隆得到毛白杨 CPR 基因、成功在体外表达可溶性蛋白并通过构建 GFP 偶联载体观察其亚细胞定位，本研究通过 RT-PCR 的方法克隆得到了毛白杨 CPR 基因，登录号为 MK575137。进一步通过生物信息学分析，发现毛白杨 CPR 与毛果杨 CPR 同源性最高，均有着典型的细胞色素 C 还原酶结构域。随后在酵母表达体系中表达该蛋白，验证了该蛋白不能被分泌表达，表明 CPR 蛋白为膜蛋白。进一步的亚细胞定位实验表明，CPR 蛋白定位于内质网。CPR 蛋白是 P450 单加氧化酶催化木质素合成的相关过程中必不可少的辅酶，该研究可为今后体外验证毛白杨 P450 单加氧化酶在木质素合成的相关过程中的酶活活性提供基础。

毛白杨(Populus tomentosa)；CPR；P450；亚细胞定位