吾尕力汗·阿不都维力 , 杨迷 , 代培红 , 宁忠雄 , 李月^*

新疆农业大学农学院, 乌鲁木齐, 830052
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2019年02月08日    接受日期: 2019年02月20日    发表日期: 2020年02月17日

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ROP 是高等植物里一类分布广泛的信号小 G 蛋白，在植物生长、发育、抗逆、抗病和激素信号转导过程中起重要调控作用。本研究用 PCR 体外扩增技术获得棉花 GhROP1 基因片段，将目的基因与诱饵质粒载体 pGBKT7 通过双酶切定向重组，构建诱饵质粒 pGBKT7-GhROP1，并成功的转入到 Y187 酵母菌通过缺陷性培养基培养进行毒性和自激活检测。结果表明，成功克隆棉花 GhROP1 基因，该基因开放阅读框共有591 bp。双杂交诱饵表达载体 pGBKT7-GhROP1构建成功，并成功转化酵母菌 Y187；结果显示含表达载体的酵母菌 Y187 在 SD/-Trp 平板上长势良好，说明表达蛋白对酵母菌无毒害作用。在 SD/-Leu，SD/-Trp-Leu，SD/-Trp-Leu-His-Ade 平板上则没有生长，说明转化 pGBKT7-GhROP1 质粒后的 Y187 酵母菌无自激活发生。本研究结果为下一步利用酵母杂交系统筛选 GhROP1 蛋白相互作用的蛋白提供理论参考。

GhROP1 基因；酵母双杂交；诱饵表达载体； 自激活检测