黄静¹ , 常沙沙¹ , 杨卫丽² , 曾玉¹ , 高新征^1*

1 海南医学院基础医学与生命科学学院, 海口, 571199; 2 海南医学院药学院, 海口, 571199
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2019年03月15日    接受日期: 2019年04月23日    发表日期: 2020年04月06日

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利用分子克隆的方法构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因 Adkc 的双 T-DNA 表达载体。首先设计基因 Adkc、启动子 E8 和终止子 Hsp 的引物，选用植物双 T-DNA 表达载体 pGreen-DT。其次将 E8、Adkc和Hsp 按顺序连接到载体上，构建 Adkc 双 T-DNA、果实特异表达的表达载体。使用 Q5 超保真酶成功把Adkc 和 Hsp 扩增到一起，经酶切和连接后将启动子 E8、Adkc 和 Hsp 成功插入植物双 T-DNA 表达载体pGreen-DT 上。成功构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因 Adkc 的双 T-DNA 表达载体。为后续研究中将该载体转入植物中表达，分析 Adkc 的功能及其参与的代谢途径、获得高效表达虾青素且不含抗生素基因的转基因植株做好了前期准备。

虾青素；夏侧金盏花；Adkc；pGreen-DT 载体