吉林师范大学生命科学学院, 吉林省植物资源科学与绿色生产重点实验室, 四平, 136000
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 15 篇
收稿日期: 2019年02月18日 接受日期: 2019年02月20日 发表日期: 2020年02月16日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 15 篇
收稿日期: 2019年02月18日 接受日期: 2019年02月20日 发表日期: 2020年02月16日
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摘 要
稳定高效的遗传转化系统是对苜蓿进行基因改良的重要前提条件。本实验以吉林省适产苜蓿品种为实验材料,对农杆菌介导的次生胚遗传转化系统中的各种关键影响因素进行了优化:胚性愈伤诱导培养基中 2,4-D 和 KT 的最适浓度分别为 2 mg/L 和 0.5 mg/L;体胚分化培养基中 6-BA 和 NAA 的最适浓度均为0.5 mg/L;该法最适受体基因型为公农系列苜蓿品种;遗传转化过程中,胚性愈伤诱导培养基及体胚分化培养基中添加的卡那霉素浓度分别为 75 mg/L 和 50 mg/L。通过 GUS 基因表达检测和定量 RT-PCR 分析表明,外源基因已经顺利整合进苜蓿基因组染色体中,遗传转化效率为 20%左右。本实验为培育吉林省转基因苜蓿新品种工作提供了科学依据。
关键词
苜蓿(Medicago sativa L.); 遗传转化;次生胚