朱晓峰 , 姜涛 , 赵西拥 , 王嵩 , 汪清 , 倪皖莉

1 安徽省农业科学院作物研究所, 合肥, 230031; 2 安徽农业大学农学院, 合肥, 230036
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18卷, 第 6 篇   
收稿日期: 2018年11月19日    接受日期: 2018年12月27日    发表日期: 2020年04月29日

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为探索花生 NBS-LRR 类基因在花生抗病中的分子作用机制，本研究以花生品种‘Z525’为试验材料，采用电子克隆与 RT-PCR 相结合的方法，克隆了花生叶片中的 P9 基因。结果表明，获得一个长度为 3 557 bp 的序列，该序列包含一个完整的开放阅读框(ORF)，ORF 的长度为 3 195 bp (93 bp ~3 287 bp)，编码1 064 个氨基酸(120.4 kD)，等电点 pI 为 5.92。序列分析表明，该基因编码的蛋白与花生中假定的抗性蛋白RPP13-like 及花生 二倍体野生种 Arachis duranensis 和 Arachis ipaensis 推 测 的 抗 病蛋 白 At3g14460、RPP13-like 高度相似；P9 蛋白属于 NBS-LRR 家族，具有典型的 NB-ARC 和 LRR-3 两个保守结构域，推测该基因参与花生抗病调控过程。蛋白质亚细胞定位预测表明该基因编码的蛋白主要位于叶绿体中，可能少量分布于细胞核中，推测该基因可能主要作为叶绿体蛋白参与细胞的抗氧化、抗衰老等抗逆过程，其次作为转录因子参与转录调控作用。本研究克隆了 P9 基因的全长 cDNA 序列，并对该基因序列、结构和功能等方面进行了分析，为进一步研究花生抗病分子机制提供理论基础，同时为花生抗病品种的选育提供理论支持。

花生；P9 基因；克隆；序列分析