中南民族大学生命科学学院, 武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室, 生物技术国家民委重点实验室, 武汉, 430074
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 17 篇
收稿日期: 2018年11月28日 接受日期: 2018年12月03日 发表日期: 2019年12月14日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 17 篇
收稿日期: 2018年11月28日 接受日期: 2018年12月03日 发表日期: 2019年12月14日
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摘 要
结合重测序、图位克隆技术和转录组测序得到了一个水稻黄叶突变的候选基因,预测该基因是一个编码镁离子螯合酶玉亚基的未知功能基因,植物叶绿体镁离子螯合酶是四吡咯化合物生物合成途径中合成叶绿素分支(镁分支)的第一个酶。本研究利用 CRISPR-Cas9 技术,采用一步法构建该基因的 pC1300-Cas9-12976 重组载体。将该重组载体进行农杆菌介导的水稻遗传转化,得到 T0 代转基因植株的阳性,完成转基因植株中目的基因的序列分析。结果表明,T0-Cas9-12976 转基因编辑率为 71.4%。为进一步验证该基因的生物学功能提供了良好的依据。
关键词
水稻;镁离子螯合酶; CRISPR-Cas9;遗传转化