李聪 , 杨莹莹 , 王美军 , 陈己任^*

湖南农业大学园艺园林学院,长沙, 410128
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 19 篇   
收稿日期: 2018年11月27日    接受日期: 2018年12月04日    发表日期: 2020年06月17日

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CRISPR/Cas9基因编辑系统是植物基因功能研究的重要工具，月季TCP9基因可以调控花器官的发育，应用 CRISPR/Cas9技术构建敲除月季TCP9基因的表达载体，可以为月季TCP9基因的调控机制提供更多信息。根据TCP9基因的保守序列，设计了一对互补引物，用 T4连接酶连接到质粒载体 pKSE402 (该载体含有 eGFP)中；通过测序确定所构建载体的正确性，通过冻融法将含有TCP9基因的重组质粒转入农杆菌(EHA105)中。以农杆菌为模板 PCR扩增以及 eGFP瞬时表达证明月季TCP9基因敲除表达载体已构建成功。本研究表明了含有TCP9基因的表达载体能在植物中高效表达，为进一步研究提供了一定的科学依据。
 

eGFP；农杆菌；表达载体；月季；拟南芥