李彩弟 , 任玉玲 , 杨成兰 , 苏联攀 , 祁小清 , 李萍^* , 杨国柱^*

青海大学生态环境工程学院, 省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室, 西宁, 810016
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2018年11月19日    接受日期: 2018年12月20日    发表日期: 2019年08月08日

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为了研究 G6PDH 在紫花苜蓿抗低温胁迫中的作用，以‘青大 1 号’紫花苜蓿为材料，利用基因克隆、RACE 技术获取‘青大 1 号’紫花苜蓿葡萄糖 -6- 磷酸脱氢酶(G6PDH)基因，并进行生物学信息分析和超表达载体的构建。结果显示，成功克隆了一个紫花苜蓿 G6PDH 基因，该基因 cDNA 全长 2 260 bp，含有 1 个长度为 1 752 bp 的开放阅读框，编码 583个氨基酸。MsG6PDH 与鹰嘴豆、大豆、羽扇豆等序列一致性达到 88%以上；在进化上，MsG6PDH 与同为豆科植物的绿豆、野大豆、大豆亲缘关系最近。经预测，MsG6PDH 蛋白二级结构中，琢- 螺旋占 37.91%，茁- 折叠占 5.66%，无规则卷曲占 40.31%，并预测得到其三级结构。分析 MsG6PDH编码的氨基酸序列得知，MsG6PDH 蛋白分子量为 65.71 kD；理论等电点为 8.25；不稳定系数为44.54，为不稳定蛋白，并且属于亲水性蛋白。此外，还同时成功构建了该基因的植物超表达载体 pPZPY112-MsG6PDH。本研究将为明确 G6PDH 在紫花苜蓿响应低温的信号转导途径中的作用提供理论依据。

紫花苜蓿(Medicago sativa L.)；G6PDH；基因克隆；载体构建