张景荣^1* , 冯媛媛 ² , 叶昌华 ¹ , 张聪 ² , 肖宇 ² , 李臻 ¹ , 白冯 ² , 王辉 ¹

1 四川省植物工程研究院, 成都, 611730; 2 成都师范学院化学与生命科学学院, 成都, 611130
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2018年11月19日    接受日期: 2018年10月23日    发表日期: 2019年12月14日

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黄秋葵(Abelmoschus esculentus)组织中富含影响其 DNA 提取质量的多糖、多酚。为探究这一特性，本研究以黄秋葵幼叶为材料，探索了一种新的基因组 DNA 提取方法——硅胶膜离心柱法，利用硅胶膜离心柱与自配的溶液提取了高质量的 DNA。此法先用不含十六烷基三甲基溴化铵(cetyl-trimethyl-ammoniumbromide, CTAB)的缓冲液去除一部分次生代谢物；然后用 3% CTAB 缓冲液分离 DNA；再用氯仿 / 异戊醇(24:1)抽提，之后用硅胶膜离心柱纯化 DNA。运用琼脂糖凝胶电泳、ISSR-PCR 扩增和限制性酶切等方法检测DNA 的质量，并与传统 CTAB 法、十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)法和高盐低 pH 法进行比较分析。结果表明，本法提取的 DNA 完整性好，纯度高；能被 EcoR玉完全消化；ISSR 扩增得到的条带最清晰、多态性好，明显优于其它 3 种传统方法。此外，本方法也成功用于石斛(Dendrobium)、葡萄(Vitis spp.)、无花果(Ficus carica)、芦荟(Aloe vera)等植物基因组 DNA 的提取，因此具有广泛的适用性，可为富含多糖植物基因组DNA 的提取提供参考。

黄秋葵(Abelmoschus esculentus)； DNA 提取； 次生代谢物； 硅胶膜离心柱