吴良¹ , 张世清² , 陈河龙² , 郭永康² , 高建明^2* , 易克贤^3*

1 海南大学热带农林学院, 海口, 570228; 2 中国热带农业科学院热带生物技术研究所, 海口, 571101; 3 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所, 海口, 571101
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 31 篇   
收稿日期: 2018年09月21日    接受日期: 2018年10月12日    发表日期: 2019年05月22日

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为了获取良好的剑麻悬浮细胞体系，以剑麻无菌幼苗嫩叶为诱导材料，对剑麻胚性愈伤组织的获得，建立细胞悬浮系和影响悬浮细胞增殖的主要影响因子进行了探讨。结果表明：幼叶在培养基为 MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA 上诱导的愈伤组织，经 1~2 次继代培养后获得了颗粒状、浅黄色的胚性愈伤组织；接种于液体培养基接种量为 2 g (鲜重)，继代周期为 7 d，经 4~5 次继代震荡培养建立了细胞悬浮系，细胞生长符合“S”型曲线，细胞浓度可达 6.1伊105~4.6伊106 个/mL 以上；在悬浮细胞生长前期，pH 值明显下降，在细胞对数生长期，pH 值略有升高，并趋于平缓；最适宜的细胞悬浮培养基为(MS+1.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L 6-BA垣350 mg/L 水解酪蛋白, 30 g/L 蔗糖, pH 值为 5.8)。通过建立剑麻悬浮细胞培养体系的方法，为进一步应用于剑麻悬浮细胞转化体系和多倍体育种等研究。
 

剑麻；愈伤组织；细胞悬浮培养；生长曲线