胡一凡¹ , 狄义宁¹ , 张雪梅¹ , 杨志清^1,2,3,4*

1 云南农业大学农学与生物技术学院,昆明, 650201; 2云南农业大学云南省药用植物生物学重点实验室, 昆明, 650201; 3 云南农业大学西南中药材种质创新与利用国家地方联合工程研究中心, 昆明, 650201; 4 云南省芳香生物工程技术研究中心,昆明, 650201
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 28 篇   
收稿日期: 2018年09月12日    接受日期: 2018年10月16日    发表日期: 2019年01月29日

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草果为药食两用的草本植物，近年来在市场上供不应求，但关于草果居群的分子鉴定及种质资源的研究极为稀少。为使云南草果产业更加健康和可持续的发展，本实验对云南草果进行了 SSR-PCR反应体系的优化及引物的筛选，为研究草果遗传多样性提供了依据。实验采用 L16(43)正交试验设计，对 PCR反应体系中的 3个因素(2伊Taq PCR Starmix,引物, DNA模板)进行优化，并利用单因素分析法，对 PCR退火温度、 PCR扩增产物点样量进行实验与分析。 最终确定 5个因素的最佳水平，即 DNA模板(50 ng/滋L) 2 滋L， 2伊Taq PCR StartMix 6 滋L，正反引物(10 滋mol/L)各 1.5 滋L， dd H2O补足至 20 滋L (即加入 ddH2O 9 滋L)， PCR 产物点样量可以选择在1.5~2 滋L之间。从 48对SSR引物中筛选出了 7对扩增结果好的引物。7个 SSR引物可用于草果资源的遗传多样性研究，为分子技术研究提供了科学依据。

草果；反应体系优化；SSR引物筛选