肖海峻 , 孟利前 , 朱建晨 , 张进 , 李庞博 , 黄广学

北京农业职业学院, 北京, 102442
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 20 篇   
收稿日期: 2018年06月27日    接受日期: 2018年08月09日    发表日期: 2019年08月05日

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随着现代分子生物学技术的发展，反转录聚合酶链式反应技术(reverse transcription-polymerase ch- ain reaction, RT-PCR)在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛，其有灵敏度高、特异性强等优点，采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒 RNA。甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus, SPFMV)是导致甘薯发生病害的主要病毒之一，为建立甘薯 SPFMV快速检测技术，更好地防止该病毒的发生，本研究根据NCBI GenBank中收录的甘薯羽状斑驳病毒外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了 4对特异性引物，使用天根生化科技(北京)有限公司生产的植物总 RNA提取试剂盒、 FastQuant cDNA第一链合成试剂盒和2伊Taq PCR MasterMix试剂盒，完成特异性引物的筛选并设置不同的退火温度对 PCR 扩增体系进行优化，确定了甘薯羽状斑驳病毒的RT-PCR检测技术体系。该方法的建立旨在为生产上甘薯 SPFMV病毒的快速检测提供技术支持。

甘薯；羽状斑驳病毒；RT-PCR检测技术