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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 9 篇
收稿日期: 2018年08月02日 接受日期: 2018年08月23日 发表日期: 2019年02月28日
白粉病是橡胶树的主要病害之一,为阐明橡胶树与白粉菌分子互作机制,本研究基于已报道的负调控基因 LFG 为基础,克隆出橡胶树中同源基因 LFG1 和 LFG2,采用同源克隆方法,以橡胶树基因组 DNA 和cDNA 为模板,PCR 扩增 HbLFG1 和 HbLFG2 基因;利用生物信息学方法分析该基因及其同源蛋白;并分别对白粉菌侵染不同时间和不同病害等级的橡胶树叶片进行 RT-PCR 测定,检测 HbLFG1 和 HbLFG2 的基因表达量。HbLFG1 和 HbLFG2 基因的核酸和氨基酸分析结果分别为:cDNA 序列全长均为 729 bp 及由 242 个氨基酸编码组成,蛋白的分子量为 27.220 kD 和 27.248 kD,等电点为 8.24 和 8.63,正负电荷残基数为 15 和12 与 13 和 11,脂肪系数是 132.52 和 130.50,不稳定系数为 24.19 和 26.51,总平均亲水性 0.958 和 1.011。两个基因都有 7 个跨膜结构域,不含有信号肽,蛋白都属于 BI-1 家族,蛋白模序有 5 处差异,两个基因与辣椒和柑橘的 BI1-like 蛋白同源性最为接近。HbLFG1 随白粉菌侵染时间和病害等级的增加均呈现先上升后下降的趋势;HbLFG2 随病害等级的上升呈现先上升后下降的趋势,但是随白粉菌侵染时间的增加呈现持续上升的趋势。HbLFG1 和 HbLFG2 两个基因的表达量都与橡胶树白粉菌的侵染有关,但两者存在一定差异。本研究有助于深入阐释橡胶树与白粉菌分子互作机制。