1 广西大学农学院, 南宁, 530004; 2 广西药用植物园, 广西药用资源保护与遗传改良重点实验室, 南宁, 530023; 3 苍溪县兴科现代农业科技研究院有限公司, 苍溪, 628400
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 13 篇
收稿日期: 2018年07月20日 接受日期: 2018年08月17日 发表日期: 2019年08月08日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 13 篇
收稿日期: 2018年07月20日 接受日期: 2018年08月17日 发表日期: 2019年08月08日
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摘 要
为了创制可免除人工授粉的转基因罗汉果雌性品系,利用植物双元表达载体 pBI121-Gus,构建幼果实特异启动子 2A11 与单性结实相关基因 rolB 的嵌合基因表达载体 pBAR (pBI121-2A11-rolB)。以罗汉果雌株叶盘为材料,以 EHA105 农杆菌介导遗传转化,经 PCR 扩增,鉴定出阳性植株,对阳性雌株进行扩繁、生根,最后移栽大田,并观察转基因植株的单性结实性状表现。结果显示,成功构建了单性结实相关基因的pBAR 嵌合双元表达载体;转化感受态根癌农杆菌 EHA105 后,进一步转化雌株叶片,经过对叶片分化苗的检测,得到 7 株阳性植株,转化率为 14.29%。为提高成活率,扩繁 7 株阳性植株,获得 37 株转基因单性结实植株株系,其中有 8 株正常开花,占总数的 21.62%,正常开花的植株,未经人工授粉,发育成幼果,表现出单性结实性状。本实验在克隆单性结实相关基因和果实特异启动子的基础上,构建嵌合基因载体,通过根癌农杆菌介导的叶盘转化法,获得了转基因罗汉果单性结实雌株系,为后续研究罗汉果单性结实性的遗传、生理、品种综合改良和深入利用提供了基础。
关键词
罗汉果(Siraitia grosvenorii);单性结实基因;果实特异启动子;载体构建;遗传转化