胡庆林^1,2 , 江琴¹ , 黄钰麟¹ , 李素珍¹ , 吴沙沙^1,2 , 翟俊文^1,2

1 福建农林大学园林学院, 福州, 350002; 2 福建农林大学海峡兰花保育研究中心, 福州, 350002
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 20 篇   
收稿日期: 2018年07月20日    接受日期: 2018年08月22日    发表日期: 2019年02月20日

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植物叶片中含有的多糖、蛋白质和多酚等物质，很大程度会影响总 DNA 的提取质量。本研究以剑叶虾脊兰(Calanthe davidii)和银带虾脊兰(Calanthe argenteo-striata)幼嫩叶片为材料，采用改良 CTAB 法提取总DNA，设置样品重量(0.05 g, 0.10 g, 0.20 g)、清洗时间(10 min, 20 min, 30 min)、水浴温度(25℃, 60℃, 45℃)、水浴时间(2 h, 1 h, 0.5 h) 4 因素 3 水平正交试验，探究不同因素、不同处理对 DNA 得率和纯度的影响，以获取最佳提取条件。研究发现剑叶虾脊兰和银带虾脊兰 DNA 的最佳提取条件均为：样品重量 0.2 g、清洗时间 30 min、水浴温度 60℃、水浴时间 2 h。该处理下剑叶虾脊兰 DNA 产率最高为 490.5 ng/滋L，A260/A280 均值为 1.953；该处理下银带虾脊兰 DNA 产率最高为 139.83 ng/滋L，A260/A280 均值为 1.967。各因素对剑叶虾脊兰 DNA 产率影响次序为：样品重量>清洗时间>水浴温度>水浴时间；各因素对银带虾脊兰 DNA 产率影响为：样品重量>水浴温度>清洗时间>水浴时间。本研究为虾脊兰属的分子生物学研究提供科学依据。

虾脊兰属植物；正交试验；DNA 提取方法优化；分子生物学