段媛媛 , 卢超 , 郭杰 , 郭晓亮 , 周武先 , 游景茂

湖北省农业科学院中药材研究所,恩施, 445000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2018年06月22日    接受日期: 2018年07月23日    发表日期: 2019年08月05日

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采用均匀设计和单因素试验相结合的方法，探寻鉴定铁皮石斛及霍山石斛 ISSR-PCR 最佳的各组分(即引物, 2伊Taq Master Mix,模板 DNA)用量， 为进一步利用 ISSR分子标记鉴别铁皮石斛和霍山石斛提供理论依据。结果表明， ISSR-PCR最佳反应体系为： 20 滋L的反应体系中含有 2伊Taq Master Mix 11.5 滋L，模板 DNA 35 ng， 引物 0.4 滋mol/L。此外，筛选出 6 条多态性较好、条带稳定的引物(UBC826, UBC827, UBC834,UBC842, UBC849及 UBC817)，并对该反应体系进行了验证，结果表明，所选引物及最佳反应体系对铁皮石斛和霍山石斛的ISSR扩增稳定性强，可用于铁皮石斛和霍山石斛的鉴定。

铁皮石斛；霍山石斛；ISSR；体系优化