熊发前¹ , 刘俊仙 ² , 刘菁¹ , 贺梁琼¹ , 蒋菁¹ , 唐秀梅¹ , 黄志鹏¹ , 吴海宁¹ , 钟瑞春¹ , 韩柱强¹ , 唐荣华¹

1 广西农业科学院经济作物研究所, 南宁, 530007; 2 广西农业科学院甘蔗研究所, 南宁, 530007
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 18 篇   
收稿日期: 2018年06月21日    接受日期: 2018年07月17日    发表日期: 2019年05月09日

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花生是世界上重要的油料作物和经济作物之一，也是最重要的植物食用油来源之一，但花生分子标记和功能基因组学等分子生物学研究较落后。因此，本研究旨在建立适合自身的花生基因组 DNA 的提取方法，为开展花生分子标记研究和分子生物学研究提供帮助。本研究使用了 5 种改良 CTAB 法提取花生基因组 DNA，所得 DNA 的纯度和浓度分别通过琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测，再利用 8 种分子标记技术的 48 条单引物和 4 对转座子保守区扩增引物对提取获得的花生基因组 DNA 的质量进行扩增验证和应用。结果表明：(1)综合花生基因组 DNA 的质量检测数据以及花生分子标记技术和转座子保守区的扩增验证结果来看，五种改良 CTAB 法的 DNA 提取效果表现依次为：方法一>方法五>方法四>方法三>方法二，其中
方法一为最佳首选，方法五和方法四的提取效果也好，但是由于其有利用到强腐蚀性的平衡酚，不安全且不环保，所以不推荐；(2)在花生上建立了 8 种分子标记技术和 4 类转座子保守区的扩增体系；(3)克隆获得了花生 4 类转座子保守区序列。本研究为今后开展花生分子标记研究及转座子的克隆鉴定利用提供了帮助。

花生；DNA；分子标记技术；转座子；单引物扩增反应