1 福建农林大学林学院, 福州, 350002; 2 国家林业局杉木工程技术研究中心, 福州, 350002
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 22 篇
收稿日期: 2018年06月07日 接受日期: 2018年09月23日 发表日期: 2019年08月27日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 22 篇
收稿日期: 2018年06月07日 接受日期: 2018年09月23日 发表日期: 2019年08月27日
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摘 要
杉木(Cunninghamia lanceolate (Lamb.) Hook.)是中国南方特有的速生用材树种,其组织富含多酚多糖,RNA 提取非常困难,特别是对于微量组织尤为明显。根据杉木的特点,本研究采用改良 CTAB 法,优化试剂用量,用冰取代液氮研磨样品,研究比较了杉木不同微量组织总 RNA 提取效果。研究结果表明,本方法可从起始量为 100 mg、50 mg、25 mg 和 10 mg 的杉木茎、叶、花、根组织中得到高质量总 RNA,其中 100 mg 叶中得到总 RNA 的浓度最高为 223.5 ng/μL,A260/280 为 1.86,而 10 mg 根中得到总 RNA 浓度为 29.6 ng/μL,A260/280 为1.64。经琼脂糖凝胶电泳检测,所提总 RNA 条带清晰无拖尾,产量高、质量较好。进一步反转录后,利用特异引物进行扩增验证,发现扩增的片段条带清晰,得率高,片段大小符合预期。该结果为提取杉木微量组织总RNA 提供参考,为推动杉木微量组织在转录水平上的研究提供了科学依据。
关键词
杉木(Cunninghamia lanceolate (Lamb.) Hook.);微量组织;RNA 提取;改良 CTAB 法