黄真池 , 陈广欣 , 伍思韵 , 邝嘉怡 , 黄真池

1 岭南师范学院生命科学与技术学院,湛江, 524048; 2 岭南师范学院,资源植物工程中心,湛江, 524048
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 13 篇   
收稿日期: 2018年05月10日    接受日期: 2018年05月09日    发表日期: 2019年08月05日

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理想病原诱导型启动子的应用在植物抗病基因工程中非常重要。本研究以高粱、玉米和小麦为材料，检测人工病原诱导型启动子 GWSF在单子叶植物叶组织中的诱导转录特性，寻找理想病原诱导型启动子。用 GWSF替代 pBI121 中调控 gus 基因的 CaMV35S 启动子构建重组质粒，导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) GV3101；通过农杆菌渗入法转化高粱、玉米和小麦 12 h 后，用水杨酸，青枯菌，疫霉菌孢子诱导处理 12 h，本底表达用无菌水处理 12 h；最后用 GUS 染色法和实时荧光定量 PCR (real-time quantitative PCR, qPCR)检测 GWSF的转录特性。GUS染色结果显示： GWSF在三种植物中都具有本底低、受水杨酸，青 枯菌，疫霉菌孢子诱导的特性。设 CaMV35S的转录活性为 1， qPCR 结果为： GWSF在高粱中本底水平为0.67，受水杨酸，青枯菌，疫霉菌孢子诱导时，转录活性明显升高，分别为： 2.53、 0.87、 7.33；玉米中本底水平为0.11，受水杨酸，青枯菌，疫霉菌孢子诱导时，转录活性分别为： 1.92、 0.19、 2.06；小麦中本底水平为 0.13，受水杨酸，青枯菌，疫霉菌孢子诱导时，转录活性分别为： 0.69、 0.45、 1.16。结果表明，GWSF在三种单子叶植物叶组织中具有本底低、诱导因子广、诱导活性高的特性，是较理想的人工病原诱导型启动子，可应用于单子叶植物转基因抗病育种。

单子叶植物；GWSF；水杨酸；青枯菌；疫霉菌