西北民族大学生命科学与工程学院, 西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室, 兰州, 730030
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 35 篇
收稿日期: 2018年05月10日 接受日期: 2018年05月24日 发表日期: 2019年01月24日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 35 篇
收稿日期: 2018年05月10日 接受日期: 2018年05月24日 发表日期: 2019年01月24日
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摘 要
本研究以藏药柳茶(Sibiraea angustata (Rehd.) Hand.-Mazz.)为研究材料,以 MS 为基本培养基,附加6-BA、NAA、2,4-D 和 KT 等 4 种植物激素,采用正交试验研究不同激素配比对藏药愈伤组织诱导的影响,同时从消毒灭菌处理以及抗褐化剂类型的选择等方面进行了综合研究,以期为利用现代生物技术方法保护和利用藏药柳茶物种资源提供一种新的途径和方法。结果表明:经过 75%酒精(0.5 min)+ 3% NaClO (1 min)+0.1% HgCl2 (5 min)混合消毒处理后的柳茶叶片与带腋芽茎段,其消毒效果最佳;与柳茶的叶片相比,带腋芽茎段的外植体在基础培养基(MS)中添加 2 mg/L 6-BA 及 1 mg/L NAA 后诱导出芽率最高,可达到 86.67%,适合作为外植体进行组培快繁;在培养基中添加不同种类的抗褐化剂均可减轻外植体的褐化程度,但添加0.01 g/L AgNO3 后的抗褐化效果最佳且差异显著(p<0.05),可使柳茶叶片和带腋芽茎段的褐化率分别降至45.6%、14.4%。因此,经消毒处理、添加生长激素及抗褐化处理后的柳茶带腋芽茎段,其愈伤组织诱导率最高,适合作为柳茶的最佳外植体进行组培快繁。藏药柳茶愈伤组织诱导体系的建立将为青藏高原特有植物柳茶的种质资源保护和引种驯化以及关键功能基因的分子生物学研究提供材料和技术基础。
关键词
藏药柳茶;组织培养;污染率;诱导率;褐化