林海燕¹ , 罗勇¹ , 陈丝¹ , 禹双双¹ , 曾泽媛¹ , 刘仲华^1,2,3 , 王坤波^1,2,3* , 黄建安^1,2,3*

1 湖南农业大学, 茶学教育部重点实验室, 长沙, 410128; 2 国家植物功能成分利用工程技术研究中心, 长沙, 410128; 3 湖南省植物功能成分利用协同创新中心, 长沙, 410128
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《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 11 篇   
收稿日期: 2018年05月10日    接受日期: 2018年06月10日    发表日期: 2019年05月15日

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茶树咖啡酰辅酶 A-O- 甲基转移酶(CCoAOMT)是甲基化 EGCG 生物合成的一种重要酶，为探明CCoAOMT 基因的表达调控规律，进一步解析甲基化 EGCG 生物合成的调控机制。本研究采用同源克隆法获得了茶树 CCoAOMT 的 cDNA 全长序列，采用染色体步移技术(Genome walking)获得了该基因的启动子序列，并对其序列进行了生物信息学分析。结果表明，CCoAOMT 全长 cDNA 为 1 000 bp，其中开放阅读框长735 bp，编码 245 个氨基酸，含有 caffeoyl-CoA O-methyltransferase 和 SAM 功能结构域；进一步分离得到CCoAOMT 基因上游调控序列 1 624 bp，发现其含启动子核心元件 TATA-box、CAAT-box 及 5'UTR Py-richstretch (高水平转录顺式作用元件)、MYB (干旱诱导时的 MYB 结合位点)、G-box、GAG-motif、GATA-motif、GT1-motif、Sp1 (光响应元件)、CGTCA-motif、TGACG-motif (茉莉酸甲酯响应元件)等重要顺式作用元件。由结果推测，CCoAOMT 基因在转录水平受各类转录因子的调控，该结论为进一步研究 CCoAOMT 基因的转录调控机制提供了理论指导。
 

茶树；CCoAOMT；基因克隆；启动子