张婉茹 , 杨军丽 , 吴丽群 , 吴姝菊 , 王晓萍

哈尔滨师范大学生命科学与技术学院, 哈尔滨, 150025
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2019 年, 第 17卷, 第 29 篇   
收稿日期: 2018年04月09日    接受日期: 2018年05月16日    发表日期: 2019年02月20日

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本研究以寒地稗草为实验材料，采用正交试验方法对影响 ISSR-PCR 反应体系的 4 个因素进行优化。研究结果表明，寒地稗草 ISSR-PCR 的最佳反应体系(20 滋L)为：10伊PCR Buffer (含 Mg2+) 2 滋L，dNTPs 浓度为 0.3 mmol/L，引物浓度为 0.2 滋mol/L，Taq DNA 聚合酶为 0.75 U ，模板 DNA 含量为 20 ng。并确定了引物 UBC888 的最佳退火温度为 51.9℃。利用该反应体系对 15 份寒地稗草的基因组进行扩增，结果证明优化后的 ISSR 反应体系稳定可靠，可为稗草种质资源的遗传多样性研究提供理论基础。

寒地稗草；ISSR；正交试验；反应体系