湖南农业大学农学院, 南方粮油作物协同创新中心, 长沙, 410128
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 11 篇
收稿日期: 2018年03月15日 接受日期: 2018年03月31日 发表日期: 2019年01月17日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 11 篇
收稿日期: 2018年03月15日 接受日期: 2018年03月31日 发表日期: 2019年01月17日
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摘 要
为了研究水稻叶形相关基因 NRL2 的功能,本研究利用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术,以超级稻品种中嘉早 17 (YK17)为背景,对调控水稻叶形相关基因 NRL2 进行定点编辑,并通过农杆菌介导的方法将其转化到籼稻品种中嘉早 17 中。通过对 34 个转基因 T0 代植株进行测序,结果显示 34 个转基因植株中有 7 个纯合突变株系,6 株无突变,其余均为杂合突变。其主要分为 3 种突变方式,分别为 T,C,A 单核苷酸插入。通过对基因突变后 NRL2 编码的蛋白序列进行分析发现这 3 种突变均导致氨基酸序列移码。在 VK005-4-1 突变体株系中,NRL2 的 RNA 水平极显著下调。干旱处理结果显示,突变体耐旱能力弱于背景亲本中嘉早 17,且与耐旱相关基因在突变体中表达量显著低于背景亲本。总之,本研究利用 CRISPR/Cas9 技术敲除水稻叶形相关基因 NRL2,得到的基因敲除株系,其耐旱性显著低于背景亲本中嘉早 17,为进一步研究 NRL2 影响植物耐旱性提供技术支撑。
关键词
NRL2;耐旱性;CRISPR/Cas9;水稻