青海大学高原花卉研究中心, 西宁, 810016
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《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 19 篇 doi: 10.3969/mpb.011.000273
收稿日期: 2012年10月29日 接受日期: 2012年11月12日 发表日期: 2013年01月25日
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《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 19 篇 doi: 10.3969/mpb.011.000273
收稿日期: 2012年10月29日 接受日期: 2012年11月12日 发表日期: 2013年01月25日
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摘 要
以9个万寿菊雄性不育系总DNA为材料,利用单因素试验和正交试验设计对Mg2+、dNTPs、引物和Taq酶的浓度进行筛选,然后在此基础上筛选模板DNA浓度及ISSR引物并对引物退火温度进行梯度检测,优化得到最佳的ISSR-PCR反应体系,各个因素的最佳水平为:在25 μL反应体系中,Mg2+浓度为1.5 mmol/L、dNTPs浓度为0.20 mmol/L、引物浓度为0.5 μmol/L、模板DNA为60 ng、TaqDNA聚合酶含量为1 U。
关键词
万寿菊;雄性不育系;ISSR-PCR反应体系;正交试验