周芸 , 安邦 , 张盛敏 , 罗红丽^*

海南大学热带农林学院, 海口, 570228
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 17 篇   
收稿日期: 2018年01月17日    接受日期: 2018年02月20日    发表日期: 2018年12月20日

天然橡胶作为重要的工业原料和战略资源，主要来源于巴西橡胶树。橡胶树炭疽病一直是导致其产量难以提高的重要叶部病害之一。效应蛋白作为病原菌侵染植物的重要致病因子，已成为植物与病原菌互作领域的研究热点。为了进一步阐明橡胶树炭疽菌的致病机理，本研究通过RT-PCR技术从橡胶树胶孢炭疽菌中克隆了一个候选效应蛋白基因，命名为CgE27，该基因编码一条121个氨基酸的多肽，分子质量为13.2 kD。生物信息学分析表明， CgE27蛋白第 1~第 22 位氨基酸是典型的信号肽序列，不含任何跨膜结构域，暗示该蛋白为分泌蛋白。依据同源重组原理，构建了CgE27 基因的敲除载体 pCB1532-CgE27，并通过 PEG介导转
化法将其转入到胶孢炭疽菌原生质体细胞中进行同源交换，经过氯嘧磺隆抗性筛选和分子鉴定，成功获得敲除CgE27基因的胶孢炭疽菌敲除突变体株驻CgE27，为进一步研究胶孢炭疽菌 CgE27基因的功能提供了帮助。

胶孢炭疽菌；效应蛋白； CgE27 基因；基因敲除