李玉秋¹ , 王超越² , 夏正俊 ³ , 刘月⁴ , 桑永生 ⁴ , 袁翠平¹ , 赵洪锟¹ , 王玉民¹ , 刘晓冬¹ , 齐广勋¹ , 王英男¹ , 董英山^1*

1 吉林省农业科学院大豆研究所, 长春, 130033; 2 东北师范大学生命科学院, 长春, 130024; 3 中国科学院东北地理与农业生态研究所, 长春,130102; 4 吉林农业大学生命科学院, 长春, 130118
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 25 篇   
收稿日期: 2018年01月16日    接受日期: 2018年02月03日    发表日期: 2018年12月28日

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高分辨熔解曲线(high resolution melting, HRM)分析技术是一种高效，快速，便捷的核苷酸检测方法。本实验从染料用量、模板浓度、产物片段长度 3 个方面探索了适宜 HRM 分析的最佳条件，并利用 HRM技术对单核苷酸(single nucleotide polymorphism, SNP)及插入/缺失(insertion-deletion, InDel)检测及基因分型等方面进行了分析。结果表明：10 滋L 反应体系中，20伊Eva Green 饱和染料加入 0.1~0.3 滋L，模板浓度加入10~200 ng 不影响 HRM 分辨率；扩增产物长度在 70~190 bp 范围内，插入/缺失片段长度 3~13 bp 范围内，高分辨熔解曲线均有较好的分辨效果。利用 HRM 分析技术检测分析 F4 个体基因型，结果与 PAGE 电泳分析完全一致。本实验结果说明，HRM 技术与传统凝胶电泳基因分型方法相比，具有操作简单、分辨率高、准确快速、成本低等优点，是基因型鉴定的最佳选择。

大豆；高分辨率熔解曲线；基因分型