1北京林业大学生物科学与技术学院,林木育种国家工程实验室, 林木、花卉遗传育种教育部重点实验室,北京, 100083; 2 河南龙源花木有限责任公司,许昌, 461000
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 23 篇
收稿日期: 2018年01月17日 接受日期: 2018年02月17日 发表日期: 2019年01月17日
作者 通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 23 篇
收稿日期: 2018年01月17日 接受日期: 2018年02月17日 发表日期: 2019年01月17日
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摘 要
为研究根癌农杆菌介导的 SPDS 基因遗传转化酸枣叶片体系建立的条件,本研究以酸枣叶片为受体,采用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens, LBA4404)介导法,将 SPDS 基因导入酸枣基因组,并对其遗传转化体系进行优化,对筛选获得的转基因酸枣植株进行检测。结果表明,根癌农杆菌介导的 SPDS 基因遗传转化的最佳条件为:将预培养 3 d 的酸枣叶片,用 LBA4404菌株菌液(OD600=0.6)浸染 15 min,共培养 3 d,然后转入含 Kan 20 mg/L和 Cef 200 mg/L的筛选分化培养基上诱导分化,待抗性芽长到 2~3 cm 后,转入含 Kan 40 mg/L和 Cef 100 mg/L的筛选生根培养基上进行筛选,在以上最佳遗传转化条件下,经过 3次筛选得 到19个抗性植株,经PCR检测,有9株呈阳性,即SPDS基因已被整合到酸枣基因组中,并可以正常转录。本 研究成功建立了根癌农杆菌介导的酸枣叶片高效遗传转化体系,为枣树基因工程育种和种质创新提供了帮助。
关键词
亚精胺合成酶基因;根癌农杆菌;遗传转化;酸枣