适合双向电泳的大白菜花蕾蛋白提取及浓度测定方法  

周雪 , 冯辉 , 冀瑞琴
沈阳农业大学园艺学院, 沈阳, 110866
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 15 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000249
收稿日期: 2012年10月22日    接受日期: 2012年11月25日    发表日期: 2012年12月31日
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摘 要

高质量提取大白菜花蕾蛋白是大白菜花器官蛋白质组学研究的关键步骤。本试验以大白菜ABO1可育花蕾为材料,采用TCA丙酮沉淀法、Tris-HC1法、酚改良法、Trizol沉淀法、Tris-丙酮-酚法和尿素-硫脲提取法等六种方法分别提取花蕾全蛋白,通过Bradford法和双向电泳蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度,经双向电泳分离后得到2-DE图谱,经分析、比较图谱蛋白点的情况,找到花蕾全蛋白的最佳提取方法和浓度测定方法。结果显示:TCA丙酮沉淀法得到的2-DE图谱,蛋白点分布均匀、清晰,是一种较为理想的花蕾蛋白提取方法;采用蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度更加准确。

关键词
大白菜;花蕾;全蛋白提取;蛋白浓度测定
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《分子植物育种》印刷版
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