何红梅 , 秦智伟 , 冯卓 , 武涛 , 辛明 , 周秀艳

东北农业大园艺学院, 哈尔滨, 150030
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 9 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000538
收稿日期: 2013年01月09日    接受日期: 2013年02月07日    发表日期: 2013年03月16日

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根据黄瓜基因组数据库中Csa020719基因编码区全序列设计引物，通过RT-PCR扩增的方法从黄瓜品种津研四号的叶片中克隆得到寡肽转运蛋白基因(oligopeptide transporter gene, OPT)。基因编码区全长为2 013 bp。该基因编码的蛋白由20种氨基酸组成，含有670个氨基酸残基，分子量和理论等电点分别为73 kD和8.65。预测由该基因转录的寡肽转运蛋白为疏水蛋白，有14个连续的疏水片断。预测该蛋白不存在信号肽，为非分泌蛋白，存在OPT家族保守结构域，亚细胞定位在细胞膜上，主要功能为参与转运和底物结合。同源性和进化树的预测分析显示，OPT蛋白与毛果杨和蓖麻寡肽转运蛋白同源性分别达到了81%和79%，所转运的底物除有寡肽外，还包含有金属离子-烟草胺的螯合物等。qRT-PCR分析同一氮浓度处理OPT基因在不同部位表达结果显示，在无氮及低氮条件下，OPT基因在茎中表达量最高，其次为叶和茎尖。在高氮条件下，OPT主要在茎尖和叶中表达量较高，其次为茎，说明OPT基因在氮胁迫下存在于植物各个部位，并主要集中在生长旺盛的部位，为黄瓜的生长提供所需的能量。不同氮浓度下OPT在茎中表达分析结果显示，OPT基因在无氮及低氮下表达量增加，明显高于正常水平，并且随着氮浓度的降低，OPT的表达量增加，说明黄瓜OPT基因参与低氮胁迫应答反应，增强黄瓜耐低氮能力。

黄瓜；寡肽转运蛋白基因(OPT) ；克隆；低氮；生物信息学分析