山西农业大学园艺学院, 太谷, 030801
作者
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 8 篇
收稿日期: 2017年12月21日 接受日期: 2018年01月24日 发表日期: 2018年12月27日
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 8 篇
收稿日期: 2017年12月21日 接受日期: 2018年01月24日 发表日期: 2018年12月27日
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摘 要
类胡萝卜素裂解双加氧酶(CCDs)是类胡萝卜素氧化裂解的重要酶之一,在植物中,CCDs 催化裂解产物具有重要的作用。本研究以欧李品种‘农大 4 号’果实为试验材料,根据转录组测序数据分析,利用RT-PCR 从中克隆了到了 ChCCD4 基因。生物信息分析发现,该序列长度 1 794 bp,编码 597 个氨基酸的蛋白,分子量为 65 717.90 Da,等电点为 6.10,蛋白质二级结构主要由 琢- 螺旋,茁- 折叠,随机卷须和延伸链构成,ChCCD4 蛋白三级结构与 CCD 蛋白家族三级结构相似,具有相同的结构域。将 ChCCD4 基因连接到原核表达载体 pet-28a,转化大肠杆菌 BL21 (DE3),诱导表达,目的蛋白经过 SDS-PAGE 凝胶电泳检测,与空白对
比,检测出了目的蛋白条带。本研究为 ChCCD4 基因的功能研究提供理论依据,为欧李育种方向提供了理论参考。
关键词
欧李;ChCCD4 基因克隆;生物信息分析;原核表达