丛娇娇^1,2,3,4,5 , 王晓宇^1,2,3,4,5 , 李平^1,2,3,4,5 , 李惠根 ^1,2,3,4,5 , 张丽雪 ^1,2,3,4,5 , 张继星^1,2,3,4,5*

1 内蒙古民族大学生命科学学院, 通辽, 028000; 2 内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心, 通辽, 028000; 3 内蒙古自治区蓖麻育种重点实验室, 通辽, 028000; 4 内蒙古自治区蓖麻产业协同创新培育中心, 通辽, 028000; 5 内蒙古民族大学科尔沁植物逆境生物学研究所, 通辽,028000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 20 篇   
收稿日期: 2017年11月30日    接受日期: 2017年12月30日    发表日期: 2018年08月07日

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推荐引用：

引用格式：Cong J.J., Wang X.Y., Li P., Li H.G., Zhang L.X., and Zhang J.X., 2018, Cloning and expression vector construction of salt tolerant gene HKT in Ricinus communis, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 16(14): 4648-4657 (丛娇娇, 王晓宇, 李平, 李惠根, 张丽雪, 张继星, 2018,蓖麻耐盐基因 HKT 的克隆及表达载体构建, 分子植物育种, 16(14): 4648-4657)

为挖掘蓖麻耐盐相关基因，以盐生植物蓖麻(Ricinus communis L.)叶片为材料。设计特异性引物，克隆高亲和性钾离子转运蛋白(high-affinity K+ transporter, HKT)耐盐基因，并对其序列进行生物信息学分析。结果表明，该基因全长 1 596 bp，编码 531 个氨基酸，推测分子量为 59.74 kD，等电点(pI)为 9.32。多重序列比对和系统发育树分析表明该蛋白与木薯和橡胶树的同源性最高，分别为 69.13%和 67.03%，且与 HKT1 蛋白家族成员同源性较高，为 S-G-G-G 类型蛋白，推测该蛋白为 HKT1 类蛋白。二级结构预测蓖麻 HKT 蛋白有 9 个跨膜结构域，主要定位于内质网上，是典型的跨膜蛋白。根据蓖麻 HKT 基因序列计带有 BamH玉和 Pst玉酶切位点的引物扩增出全长基因，用限制性内切酶 BamH玉和 Pst玉进行双酶切后与表达载体 pCHF-3300 连接。本研究成功构建了蓖麻 HKT 基因的表达载体，为进一步研究该基因的转化及功能验证提供参考。

蓖麻；高亲和钾离子转运蛋白； 基因克隆；生物信息学分析；表达载体