郭彬^1,2 , 侯思宇¹ , 黄可盛^1,2 , 路阳¹ , 韩渊怀¹ , 王玉国²

1 山西农业大学生物工程研究所, 太谷, 030801;
2 山西农业大学农学院, 太谷, 030801
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 16 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000255
收稿日期: 2012年11月09日    接受日期: 2012年12月04日    发表日期: 2013年01月09日

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为确立大豆叶、花组织提取总RNA的最佳方法，比较了植物总RNA 提取试盒剂法、改良的CTAB-LiCL法和改良的热硼酸法的提取效果。通过RNA产量、纯度、凝胶电泳及后续的基因克隆和荧光定量PCR等分析，结果表明：热硼酸法所提取的叶、花总RNA含量约为其他两种方法的6倍；总RNA OD₂₆₀/OD₂₈₀值介于1.98~2.1；电泳条带完整清晰；应用获得的总RNA所克隆ZAT9-like基因，经测序获得885 bp的核酸序列与ZAT9-like (登录号: XM_003517371.1)基因同源率达99%；荧光定量分析Histone H3基因的扩增曲线与融解曲线峰型良好。说明该方法能够满足一般分子生物学下游实验的要求，是一种理想的针对大豆叶、花总RNA的的提取方法。

大豆；总RNA；热硼酸法