彭威 , 廖鹏飞 , 阎新 , 欧阳解秀 , 李绍波 , 王鑫

南昌大学生命科学学院, 江西省分子生物学与基因工程重点实验室, 南昌, 330031
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 15 篇   
收稿日期: 2017年10月16日    接受日期: 2017年11月27日    发表日期: 2018年06月22日

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肌醇磷酸神经酰胺合酶(inositol phosphoryl ceramide synthase, IPCS)是植物鞘脂合成途径中的一种关键酶，在植物生长发育和逆境适应中具有重要作用。本研究在 OsIPCS 基因外显子区域设计带有 PAM序列的靶位点，利用 PCR 扩增获得 OsIPCS 基因 sgRNA 表达盒，并成功构建 CRISPR/Cas9 敲除载体；采用根癌农杆菌介导的遗传转化获得 3 个 OsIPCS 基因的 T0 代 CRISPR 转基因植株；通过 PCR 扩增和测序确定突变类型，其中 2 株不同突变类型的 OsIPCS1 突变单株，27 株不同突变类型的OsIPCS2 突变单株，9 株不同突变类型的OsIPCS3 突变单株，为进一步开展 OsIPCS 基因功能的研究提供科学依据。

水稻；OsIPCS家族基因；CRISPR；载体构建