刘宽亮^1,2* , 赵志常^2,3* , 高爱平^2,3 , 黄建峰^2,3 , 党志国^2,3 , 罗睿雄^2,3 , 陈业渊^2,3*

1 海南大学热带农林学院, 海口, 570228; 2 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所, 农业部华南作物基因资源与种质创制重点开发实验 室, 儋州, 571737; 3 国家热带果树品种改良中心, 儋州, 571737
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 11 篇   
收稿日期: 2017年11月12日    接受日期: 2017年12月22日    发表日期: 2018年06月28日

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红色叶绿素降解产物还原酶(red chlorophyll catabolite reductase, RCCR)是叶绿素降解过程的关键酶，能将叶绿素降解过程中产生的红色叶绿素代谢物(Red chl catabolit)分解代谢为原初荧光叶绿素降解产物(Primary fluorescent chl catabolite)。本研究根据转录组测序得到 RCCR 部分片段信息设计简并引物，采取 3'和 5' cDNA 末端快速克隆(RACE)的技术方法，分别在三个不同着色芒果品种(红色‘贵妃’品种, 黄色‘金煌’品种, 绿色‘桂七’品种)中进行 RCCR 基因全长 cDNA 序列的扩增克隆得到了芒果果皮 RCCR 基因的全长cDNA 序列。结果发现三个着色品种 cDNA 序列只有几个碱基的差异，以黄色金煌品种为例分析可得全长cDNA 序列为 1 134 bp，开放阅读框为 975 bp，编码 324 个氨基酸，分子重量为 36.21 kD，等电点为 5.13。通
过生物软件预测得到了三种三级蛋白结构图。对 NCBI 上刊载的 30 种不同植物构建系统发育树发现该基因编码的蛋白与橙子、克莱门柚等水果植物的亲缘关系比其他植物物种的亲缘关系近。近年来，病毒诱导的基因沉默(VIGS)是研究植物基因功能的有力工具，为深入探究 RCCR 基因在叶绿素降解中的作用，本研究成功构建出 RCCR-pTRV2 基因沉默载体，为后续研究 RCCR 基因在芒果果实成熟及果皮着色过程中的作用机理提供理论依据。

芒果；RCCR； 叶绿素降解；病毒诱导的基因沉默(VIGS)