孙梅 , 周波 , 马光 , 刘明雪 , 李玉花

东北林业大学花卉生物工程研究所, 哈尔滨, 150040
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 21 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000437
收稿日期: 2012年11月15日    接受日期: 2012年12月15日    发表日期: 2013年02月21日

这是一篇《分子植物育种》印刷版的数字优先出版(Online Publishing in Advance)论文，如果需要下载阅读全文，请您订阅。

隐花色素CRY1在拟南芥光形态建成及光信号转导中起重要作用，在津田芜菁（Brassica rapa L. subsp. rapa ‘Tsuda’）中是否起相同作用尚未报道。本文利用实验室已克隆得到的津田芜菁CRY1基因的cDNA全长序列，在NCBI进行序列比对，选取特异的片段。同时根据Gateway克隆技术特点, 设计含有attB接头的引物。利用高保真的LA Taq DNA 聚合酶, 通过PCR方法在目的片段的两端加上attB序列。通过BP反应和LR反应将CRY1基因片段克隆到pH7GWIWG2(I)双元干涉载体。对重组载体pH7GWIWG2(I)-CRY1的鉴定结果表明成功构建了CRY1基因的干涉载体。利用Gateway 克隆技术构建植物干涉表达载体简便易行, 该结果为遗传转化研究其功能奠定了基础。

芜菁；CRY1；Gateway 克隆技术；RNA干涉