程慧^1,2 , 付海辉¹ , 周军^1,3 , 曹有龙² , 李彦龙² , 秦垦² , 戴国礼² , 段安安¹ , 段淋渊²

1西南林业大学林学院, 昆明, 650224;
2国家枸杞工程技术研究中心, 银川, 750002;
3北方民族大学, 银川, 750021
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 5 篇   
收稿日期: 2017年09月05日    接受日期: 2017年09月24日    发表日期: 2018年05月22日

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本研究以宁夏枸杞为材料，根据GenBank上已经登录的该基因的保守区设计简并引物，通过RT-PCR扩增获得基因保守片段。再利用RACE技术获得该基因3’端序列。最终，经拼接后得到一个长约1 802 bp的ms2基因片段(登录号为JQ341412.1)，终止密码子为TAG，3’端包含非编码区和PolyA尾巴。相应编码基因片段527个氨基酸的肽段。生物信息学分析表明，ms2基因序列中含有NAD(P)H区域，该区域含有显著的TGXXGXXG结构单元，以及微体结合信号区域。从第44个氨基酸到第346个氨基酸为NAD结合区，从第459个氨基酸到第517个氨基酸为雄性不育C-末端区。同源性检索表明，ms2基因片段氨基酸序列与亚麻、葡萄、大豆、拟南芥、青菜的同源性分别为71%、71%、72%、65%、66%。系统进化树分析表明，宁夏枸杞ms2基因与葡萄的亲缘关系最近，与毛果杨、亚麻以及十字花科的植物聚为一类，而与江南卷柏的亲缘关系最远。RT-PCR分析表明，ms2基因在可育花蕾的2、3时期表达非常强，而在不育花蕾的2、3时期表达较弱。

宁夏枸杞； ms2；克隆；表达分析