麻扬 , 白学良 , 赵东平^*

内蒙古大学生命科学学院, 呼和浩特, 010021
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 23 篇   
收稿日期: 2017年08月07日    接受日期: 2017年08月25日    发表日期: 2018年04月24日

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本研究采用L₁₆(4⁵)正交试验设计法对山羽藓ISSR-PCR反应进行优化试验。研究结果表明，山羽藓ISSR-PCR最佳反应体系(25 μL)为：Taq DNA聚合酶0.8 U，Mg²⁺ 1.5 mmol/L，dNTPs 0.4 mmol/L，引物0.6 μmol/L和模板DNA 40 ng，对该反应体系的影响顺序为：Taq DNA聚合酶>引物>dNTPs>模板DNA>Mg²⁺。同时筛选出12条适合山羽藓的ISSR引物，并确定了每条引物的最适退火温度。所建立的体系稳定可靠，条带清晰且多态性丰富，可为后续开展山羽藓种植资源、遗传多样性及分子亲缘地理学研究奠定基础。

山羽藓；ISSR-PCR；正交设计；反应体系；引物筛选