黄国文^* , 管天球 , 赵雨云 , 陈莫林 , 刘宏辉

湖南科技学院生化系, 永州, 425199
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16卷, 第 29 篇   
收稿日期: 2017年05月24日    接受日期: 2017年06月07日    发表日期: 2018年07月18日

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油茶叶片含有较多的多糖和多酚等次生代谢产物是提取DNA的重要障碍。本研究以油茶叶片为材料研究高质量的DNA提取方法。建立了一种改良的CTAB法，运用2×CTAB缓冲液来裂解细胞，在裂解细胞后的溶液中加入终浓度为2 mol/L LiCl，用氯仿异戊醇抽提溶液，用等体积的异丙醇沉淀DNA，用预热的70%乙醇洗涤DNA沉淀。运用紫外分析和琼脂糖凝胶电泳分析测定了DNA的产率和质量，并与经典SDS法、经典CTAB法、高盐低pH法进行了对比。结果表明，改良的CTAB法提取的DNA产率比经典SDS的少，与经典CTAB法和高盐低pH法的相似，达到39.0 μg/g,且纯度高，无RNA的污染。改良的CTAB法提取的叶片DNA可用于油茶后续的PCR分析研究。

油茶；叶片；DNA提取；改良CTAB法