甘蓝型油菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BnBADH-1)的克隆与真核表达载体的构建  

柴靓* , 李浩杰* , 蒲晓斌 , 张锦芳 , 蒋俊 , 胡海兵 , 郑本川 , 蒋梁材
四川省农业科学院作物研究所, 成都, 610066
*同等贡献作者
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2013 年, 第 11卷, 第 8 篇   doi: 10.3969/mpb.011.000053
收稿日期: 2012年09月14日    接受日期: 2012年10月20日    发表日期: 2012年11月15日
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摘 要

根据已知的拟南芥甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH1)序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜中克隆出油菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BnBADH-1)全长。测序和分析结果表明,BnBADH-1的cDNA全长1 506 bp,编码一个包含501个氨基酸残基、分子量为55 kD、等电点(pI)为5.16的假定蛋白质;核酸序列和氨基酸序列与拟南芥的同源性分别为90.24%和93.41%。利用片段两端的粘性末端酶切位点BamHⅠ和SacⅠ将cDNA片段连接在真核表达载体pBI121上;PCR鉴定表明,过量表达载体pBI121-BnBADH-1已成功构建,为下一步的基因功能分析做好了准备。

关键词
甘蓝型油菜;甜菜碱醛脱氢酶;基因克隆;载体构建
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《分子植物育种》印刷版
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