天津农学院农学与资源环境学院, 天津, 300384
作者
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 20 篇
收稿日期: 2017年04月18日 接受日期: 2017年05月22日 发表日期: 2018年01月15日
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《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 20 篇
收稿日期: 2017年04月18日 接受日期: 2017年05月22日 发表日期: 2018年01月15日
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摘要
挖掘草甘膦抗性基因将有助于抗草甘膦遗传改良作物的培育。本研究分离了一株新型草甘膦抗性菌株肠杆菌20 (Enterobacter. E20),该菌株在营养缺陷型培养基中能够耐受高达400 mmol/L草甘膦的胁迫,为充分发掘该菌株在草甘膦抗性方面的利用价值,对该菌株进行了全基因组测序(Genbank:CP012999.1)。分离克隆了肠杆菌20其EPSPS (5-烯醇式丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶)编码基因aroA20 (WP_039261572.1),该基因序列长度为1 284 bp,编码427个氨基酸,序列比对分析显示AroA20具有I型EPSPS典型的保守结构特征,系统进化分析显示AroA20与大肠杆菌K12的EPSPS具有最近的亲缘关系。利用原核表达系统鉴定了重组aroA20菌株在草甘膦胁迫下的耐受性,在转基因烟草中过表达了aroA20基因并鉴定了转基因植株的草甘膦抗性。研究肠杆菌20与其草甘膦的靶标EPSPS编码基因aroA20在草甘膦抗性上存在差异的分子机制将为深入理解生物体草甘膦抗性奠定研究基础。
关键词
微生物;肠杆菌;草甘膦耐受性;基因克隆;功能分析
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