郑本川¹ , 李浩杰¹ , 张锦芳¹ , 崔成¹ , 柴靓¹ , 蒋俊¹ , 伍先敏² , 蒋梁材¹

1四川省农业科学院作物研究所, 成都, 610066; 2仲衍种业股份有限公司, 成都, 610066
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 27 篇   
收稿日期: 2017年03月24日    接受日期: 2017年04月25日    发表日期: 2018年01月17日

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甘蓝型油菜CONSTANS目的基因的克隆以NCBI上公布的序列设计全长扩增引物进行扩增。对目的基因片段测序并进行酶切位点分析，设计酶切引物(BamHⅠ, SacⅠ)，通过BamHⅠ和SacⅠ双酶切将目的基因片段连接在真核表达载体pBI121上，PCR鉴定结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功构建。将过表达载体转化感受态EHA105细胞，通过拟南芥花絮侵染T0代种子，用含卡拉霉素(50 mg/L)的MS固体培养基进行筛选，获得阳性植株。通过PCR鉴定，结果表明PBI121+CONSTANS过表达载体已成功导入拟南芥中，获得转基因阳性苗12株，为下一步基因功能分析做好了准备。

甘蓝型油菜；过表达载体；阳性植株