研究报告 /Research Report

三角梅4,5-多巴双加氧酶基因的克隆与表达分析  

曹燕亭1 , 刘姗2 , 孙蓉1 , 陈惠1 , 解智杰1 , 黄林1 , 陈怡1
1四川农业大学生命科学学院, 雅安, 625014; 2攀枝花学院生物与化学工程学院, 攀枝花, 617000
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2018 年, 第 16 卷, 第 23 篇   
收稿日期: 2017年03月21日    接受日期: 2017年04月22日    发表日期: 2018年01月17日
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摘要

本研究通过同源克隆技术对三角梅(Bougainvillea glabra Choisy)甜菜色素合成途径中4,5-多巴双加氧酶(4,5-DOPA dioxygenase, DOD)基因进行了克隆分析。随后将获得的三角梅DOD基因克隆到表达载体pET30b (+)上,构建原核表达载体pET30b (+)-DOD,并转入大肠杆菌Rosetta (DE3)进行诱导表达。同时结合实时荧光定量PCR技术分析了遮光处理对三角梅DOD表达量和甜菜红素含量的影响。结果表明,三角梅DOD基因的cDNA序列长度为804 bp,编码268个氨基酸,GenBank登录号为KY676801。系统进化树分析显示该DOD与叶子花(Bougainvillea spectabilis Willd.)和紫茉莉(Mirabilis jalapa L.) DOD亲缘关系比较近;原核表达得到约37 kD的目的蛋白,这与预测结果相符合;实时荧光定量PCR结果表明,遮光处理使DOD表达量;同时,甜菜红素含量也表现为下降。这些研究结果为解析三角梅甜菜色素合成途径提供了理论依据,为三角梅花色形成机制的研究提供了基础资料。

关键词
三角梅;4,5-多巴双加氧酶;克隆;表达分析

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《分子植物育种》印刷版
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