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《分子植物育种》印刷版, 2017 年, 第 15 卷, 第 32 篇
收稿日期: 2017年02月22日 接受日期: 2017年04月24日 发表日期: 2017年05月09日
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摘要
利用hiTAIL-PCR方法研究了转基因水稻BarKasalath-01中外源基因在基因组上的插入位点序列特征,结果获得外源基因T-DNA右边界旁侧序列511 bp,与水稻基因组数据库比对发现,外源基因插入位点位于水稻基因组第8号染色体的第3 326 720处。根据整合位点水稻基因组序列和外源基因T-DNA左边界序列设计引物,扩增得到了左旁侧序列783 bp。基于左右旁侧序列,建立了转基因水稻BarKasalath-01的事件特异性定性PCR检测方法,扩增片段分别为783 bp和411 bp。该方法特异性强、灵敏度高,能够在BarKasalath-01基因组DNA含量为0.1%的模板中检测出转基因成份。依据旁侧序列,还建立了快速鉴定转基因后代植株基因型的3引物PCR检测方法。这些方法的建立,实现了对转基因水稻BarKasalath-01转化事件的特异性检测。
关键词
转基因水稻;旁侧序列;事件特异性检测;基因型鉴定
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